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磁珠法提取试剂的原理与尊龙凯时成分简介

来源:晏勤宁 日期:2025-03-17

磁珠法核酸提取试剂盒的工作原理是利用特定条件快速裂解生物样本,进而通过磁珠颗粒特异性地吸附核酸。这一过程经过洗涤和洗脱,能够高效地分离核酸。该试剂盒不仅提取效率高,性能稳定,还能获得高纯度的核酸,适用于多种下游实验,如酶切、反转录、PCR、RI-PCR和Southern blot等。尊龙凯时的磁珠法核酸提取试剂盒广泛应用于多种生物样本中,尤其适合提取、富集和纯化病毒核酸,其处理后的产物可用于临床体外检测。

磁珠法提取试剂的原理与尊龙凯时成分简介

磁珠法提取试剂中的一种常见成分是SDS(十二烷基硫酸钠)。其性质如下:首先,作为阴离子表面活性剂,SDS对人体微毒;其次,SDS是一种优良的发泡剂,广泛用于洗衣粉、牙膏、洗发水和灭火器中;最后,SDS易溶于热水,尤其当水温高于8℃时,其溶解度迅速增加,温度达到70℃后,溶解度增加幅度不明显。SDS的作用主要在于能断裂分子内和分子间的氢键,导致分子的去折叠,破坏蛋白质的二、三级结构,从而促进核酸的释放。

此外,yi基苯基聚乙二醇(Nonidet P40)也是常用成分,其温和的性质使其在1%的浓度下能够有效破坏细胞膜,同时对核膜的破坏作用相对较弱。同时,弱阳离子螯合树脂(Chelex-100)在提取液中用于与多价离子,特别是高价金属离子结合。它能够在低离子强度、碱性环境和加热条件下,使细胞膜破裂及蛋白质变性,通过离心去除Chelex颗粒实现DNA与结合物质的分离。需要注意的是,Chelex-100在模板中过多的残留可能会影响PCR的扩增效果。

另外,蛋白酶K(Protein K)是一种从白色念珠菌提取出的强力蛋白溶解酶,具有极高的比活性,是DNA提取的关键成分。其主要作用在于酶解与核酸结合的组蛋白,使DNA有效游离于溶液中。聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)是一种非离子表面活性剂,具有良好的稳定性,能够与生物膜中的磷脂结合,形成可溶性复合物。

异硫氰酸胍(GITC)则是一种强力的蛋白质变性剂,能够迅速溶解蛋白质,致使细胞结构破碎,与核酸分离。GITC也是经典RNA提取试剂TRIZOL的主要成分。乙二胺四乙酸(EDTA)是一种优良的钙、镁离子螯合剂,可以抑制脱氧核糖核酸酶的活动,保护DNA不受降解。Tris-HCl缓冲剂则为裂解液和核酸提供适宜的环境。

总结来看,经典的裂解液通常包含去污剂(如SDS、Triton X-100、NP-40、Tween 20等)和盐(如Tris、EDTA、NaCl等)。这些成分不仅为裂解环境提供支持(如Tris),还有效抑制样品中的核酸酶对核酸的破坏(如EDTA),并维持核酸结构的稳定(如NaCl)。通过使用尊龙凯时品牌的试剂盒,您可以确保核酸提取的高效性和准确性,为生物医疗研究提供可靠的支持。

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