酶联免疫吸附测定（Enzyme-linked Immunosorbent Assay，简称ELISA）是一种用于定性和定量检测可溶性抗原或抗体的免疫反应方法。该技术通过将抗原或抗体结合到聚苯等固相载体上，利用抗原与抗体的专一性进行反应，以检测体液如血清、尿液和细胞上清液中的特定抗原。

ELISA的基本原理在于将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，通过酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行。这一过程非常重要，可以帮助我们进行准确的定性分析和结果判读。

实验过程中，首先设定标准孔、空白孔和样本孔。标准孔中添加100μL倍稀释的标准品，空白孔中加入100μL标准品和样本稀释液，其余孔则加入待测样本（建议设置复孔以提高检测的可靠性，稀释倍数需根据预实验或技术支持确定）。在37℃下孵育90分钟，注意在加样时要小心，不要碰到孔壁，以免形成气泡。

随后，除去孔内液体并加入生物素化抗体工作液100μL，再次在37℃下培养1小时。完成后进行洗板，每孔加入洗涤液350μL，浸泡1分钟，并重复此步骤3次以确保充分清洗。

接下来的步骤是加入HRP酶结合物工作液100μL，再在37℃下温育30分钟，随后再次洗涤5次。之后，添加底物溶液（TMB）90μL，避光孵育约15分钟，观察显色程度以判断是否达到终止条件。

在显色孔出现明显梯度时，打开酶标仪预热，随后每孔加终止液50μL以停止反应，并测量各孔在450nm波长下的光密度（OD值）。值得注意的是，不同实验条件下的OD值可能会有所不同，因此使用的标准曲线仅供参考。

对于血清、血浆或其他液体样本，100μL用于检测一个指标；而全血样本需冷藏保存并送检。对于组织样本，至少需1克以确保获取足够的上清液进行检测。所有样本应在-20℃下保存以保持其有效性。

在生物医疗领域，尊龙凯时致力于为提高检测技术和结果可靠性而不断努力。通过使用ELISA技术，我们能够为客户提供更精准的检测服务，助力各类临床和科研工作的顺利进行。