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NEWS尊龙凯时免疫学ELISA检测服务
来源:常淑仁 日期:2025-02-21酶联免疫吸附测定(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,简称ELISA)是一种用于定性和定量检测可溶性抗原或抗体的免疫反应方法。该技术通过将抗原或抗体结合到聚苯等固相载体上,利用抗原与抗体的专一性进行反应,以检测体液如血清、尿液和细胞上清液中的特定抗原。
ELISA的基本原理在于将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,通过酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行。这一过程非常重要,可以帮助我们进行准确的定性分析和结果判读。
实验过程中,首先设定标准孔、空白孔和样本孔。标准孔中添加100μL倍稀释的标准品,空白孔中加入100μL标准品和样本稀释液,其余孔则加入待测样本(建议设置复孔以提高检测的可靠性,稀释倍数需根据预实验或技术支持确定)。在37℃下孵育90分钟,注意在加样时要小心,不要碰到孔壁,以免形成气泡。
随后,除去孔内液体并加入生物素化抗体工作液100μL,再次在37℃下培养1小时。完成后进行洗板,每孔加入洗涤液350μL,浸泡1分钟,并重复此步骤3次以确保充分清洗。
接下来的步骤是加入HRP酶结合物工作液100μL,再在37℃下温育30分钟,随后再次洗涤5次。之后,添加底物溶液(TMB)90μL,避光孵育约15分钟,观察显色程度以判断是否达到终止条件。
在显色孔出现明显梯度时,打开酶标仪预热,随后每孔加终止液50μL以停止反应,并测量各孔在450nm波长下的光密度(OD值)。值得注意的是,不同实验条件下的OD值可能会有所不同,因此使用的标准曲线仅供参考。
对于血清、血浆或其他液体样本,100μL用于检测一个指标;而全血样本需冷藏保存并送检。对于组织样本,至少需1克以确保获取足够的上清液进行检测。所有样本应在-20℃下保存以保持其有效性。
在生物医疗领域,尊龙凯时致力于为提高检测技术和结果可靠性而不断努力。通过使用ELISA技术,我们能够为客户提供更精准的检测服务,助力各类临床和科研工作的顺利进行。
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